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乳糖專用柱Lac-Amino使用高純度鍵合試劑在硅膠上鍵合氨基基團而得到。在藥典色譜條件下的分離過程中,對乳糖和蔗糖的檢測,分離度******滿足藥典要求,以乳糖峰計算理論塔板數均在8000以上,遠遠高于藥典規定的要求。
色譜柱:
Lac-Amino,5 μm,120 ?,4.6×300 mm
流動相:ACN: H2O= 70 : 30 (v/v)
流速:1.0 mL/min
柱溫:45oC
檢測:示差(40 ℃ )
樣品:系統適用性溶液(1.0 mg/mL乳糖+1.0mg/mL蔗糖)
進樣量:10 μL
|
名稱 |
保留時間 |
面積 |
拖尾因子 |
塔板數 |
分離度 |
|
蔗糖 |
10.93 |
84432 |
1.26 |
12213 |
|
|
乳糖 |
13.21 |
49633 |
1.18 |
9011 |
4.77 |
乳糖專用柱特點:
1. 乳糖專用柱 Lac-Amino 填料為均一的球形顆粒,******限度實現單層官能團覆蓋,確保良好的峰形。
2. 通過嚴格控制的表面化學修飾條件,確保柱與柱之間有著******的重現性。
3. 運用獨有的裝填技術得到的Lac-Amino柱床密度均一穩定,因此可******具有******的柱效。
4.符合藥典對于色譜柱基質的要求,******滿足藥典對于樣品檢測的分離要求。
乳糖專用柱產品應用:
2015版《中國藥典》一部——乳糖【含量測定】項下乳糖的測定
乳糖專用柱訂購信息:
| 色譜柱 | |||
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規格(mm x mm) |
粒度 |
孔徑 |
訂貨號 |
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4.6x300 |
5 μm |
120 ? |
Z00008-4630 |
|
4.6x50 |
5 μm |
120 ? |
Z00008-4605 |
乳糖專用柱色譜柱信息
成都摩爾科學儀器有限公司提供的賽分乳糖專用柱Lac-Amino鍵合相是以高純度 具有良好機械穩定性的硅膠為基質,通過使用高純 度鍵合試劑在硅膠上鍵合氨基基團而得到,含碳量 4.0%。該填料為均一的球形顆粒,孔徑 120 ,比 表面積 300 m2 /g。該鍵合相采用獨特的創新設計, 可******限度實現單層官能團覆蓋。通過嚴格控制的 合成反應條件,可確保柱與柱之間有著******的重現 性。通過運用獨有的勻漿裝填技術裝填得到的 Lac-Amino 柱床密度均一穩定,因此可******具有*** 高的柱效。 Lac-Amino 柱為氨基鍵合硅膠色譜柱,特別推 薦用于 2015 版《中國藥典》四部中輔料乳糖的檢 測。 圖 1 是按照 2015 版《中國藥典》四部——乳 糖含量測定項下的色譜條件,使用 Lac-Amino 4.6×300 mm 色譜柱對乳糖和蔗糖對照品溶液進行 測試的圖譜。
安全注意事項
乳糖專用柱通常在高壓下運行。如果管路連接 不緊,將會導致有機溶劑和注入樣品的泄漏,從而 對操作人員的健康產生影響。一旦發生泄漏,應佩 戴適當的手套進行處理。另外當打開色譜柱時還應 采取適當的保護措施,以防止微小的硅膠顆粒進入 呼吸道。
圖 1:蔗糖和乳糖對照品測試圖譜
色譜柱安裝與操作
色譜柱在運輸過程中或在沒有使用時,它的兩 端總是用堵頭進行密封。當將色譜柱接入色譜儀器 系統時,首先移去兩端的堵頭。請注意將流動相流 動的方向與柱上標記的方向保持一致。除非出于特 殊考慮,例如為了清除堵在色譜柱入口端的臟污等 而需要將色譜柱反接以進行沖洗時,建議用戶在接 上色譜柱時一定要遵循柱上標記的方向。由于色譜 柱的連接是整個色譜操作過程的一部分,如果密封 卡套過緊,或安裝不合適,或者密封卡套與色譜柱 端口不匹配,都有可能導致溶液的泄漏。請按照下 面步驟將色譜柱與密封卡套相連接,從而將色譜柱 接入 HPLC 系統: (a)******次使用的管線,請依次將管線接頭和密 封卡套裝在外徑 1/16”的管線上。密封卡套的寬口 端應朝向管線接頭。 (b)將管線緊緊插入色譜柱的接口,向前滑動密 封卡套和管線接頭,并使管線接頭的螺紋與色譜柱 端口的螺紋相互銜接,然后擰緊管線接頭。如果管 線為高分子材料,請轉到步驟(d);如果是金屬管 線,請繼續(c)。 (c)在用力將管線壓入柱端接口之后,用 1/4”扳手 將已擰緊的螺帽再進一步緊固。 (d)對色譜柱的另一端采用上述方法進行操作。
新的 Lac-Amino 色譜柱保存在純乙腈中。在儲 存和運輸過程中,硅膠填料可能會干涸,這時推薦 用 5~10 倍柱體積的純乙腈對色譜柱進行低流速沖 洗。接著可用 2015 版《中國藥典》四部乳糖檢測 要求的流動相 70 %乙腈水溶液平衡色譜柱,直至基 線穩定為止。如果柱壓和基線波動較大,這可能是 氣泡進入了色譜柱中。這時可用較高流速(1.0 mL/min)沖洗色譜柱 2~5 min。
樣品與流動相 為了避免色譜柱的堵塞,所有樣品和溶劑,都 必須在使用前用 0.45 μm 或 0.22 μm 的濾膜過濾。 乳糖專用柱專為 2015 版《中國藥典》四部中輔料 乳糖的檢測而設計,采用藥典規定的流動相系統進 行檢測。流動相在使用前需要脫氣,一個簡單的脫 氣方法是將流動相在由水泵形成的真空下超聲 5 min。
色譜柱的保養
pH 避免在 pH 低于 2.0 或高于 8.5 的條件下使用 色譜柱。高的 pH 會溶解硅膠,從而使部分或全部 的鍵合相從硅膠表面脫落,引起分離效率的降低和 保留時間的改變。為了獲得******的分離效果和延長 柱的使用壽命,請盡量使用 pH 在 2.0~7.5 范圍內的 流動相。
壓力 盡管乳糖專用柱可在高至 4000 psi 的壓力下 使用,但正常的操作壓力應當低于 2500 psi。長時 間在高壓下運行會損壞色譜柱和輸液泵。由于壓力 來源于流速,因此******流速將受制于系統所能承受 的壓力。一般而言,柱壓會隨著色譜柱使用時間的 增加而逐漸增加。壓力突然增加預示色譜柱入口端 的篩板發生了堵塞。在這種情況下,建議將色譜柱 反接后用適宜的溶劑進行沖洗。
溫度 ******操作溫度為 60°C。長時間在高溫(>75 °C)下操作會損壞色譜柱,這種情形在高的 pH (>8.5)條件下特別突出。 色譜柱清洗 多次使用后某些樣品中的雜質可能 會吸附到入口篩板或填料上。當積累到一定程度時 會出現壓力升高并伴隨峰形展寬的現象。出現這種 情況時,用推薦的保存溶劑純乙腈低流速活化沖洗 色譜柱即可。 儲藏 長期不用時,請用至少 20~30 倍柱體積的純 乙腈沖洗色譜柱并保存。每根色譜柱在運輸過程中 均會附有兩個可拆卸的堵頭。為了防止柱床干涸, 請用堵頭塞緊色譜柱的兩端,常溫儲存即可。